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探讨热休克蛋白70对银屑病成纤维细胞表达IL-6的影响

发布时间:2014-06-03   责任编辑:潍坊东方银屑病研究院

  摘要:探讨热休克蛋白70对银屑病皮损中成纤维细胞表达白细胞介素6的影响。通过实验分组和对照,更加直观的了解热休克蛋白70对银屑病成纤维细胞表达IL-6的影响。

探讨热休克蛋白70对银屑病成纤维细胞表达IL-6的影响

  研究者选择10例进行期银屑病患者皮损进行真皮成纤维细胞的原代培养,取3-8代细胞用于实验研究。在培养基中加入不同浓度的HSP70以及某一浓度的NF-KH特异性抑制剂毗咯琳烷二甲基硫脉(PDTC),并孵育不同时间,以正常生长的银屑病成纤维细胞(psoriatic fibroblasts. PFb)为对照组。

  实验中,用ELISA方法检测PFI上清中IL-6的含量,以及用半定量RT-PCR方法检测PFbIL-6mRNA的表达。采用SPSS 13.0统计软件对数据进行t检验和方差分析。

  结果:

  1,HSP70刺激PFb表达IL-6蛋白和IL-6mRNA的水平在四十八小时内呈一定的量效关系。ELISA法检测示:5,10,20,30ug/m1HSP70刺激PFb产生IL-6分别是对照组的1.36倍、1.59倍、2.87倍和3.77倍。半定量RT-PCR法检测示:上述浓度的HSP70刺激PFb表达IL-6mRNA的ODIL-6/ODB-actin值分别是对照组的1.24倍、1.76倍、2.20倍和2.52倍。

  2,HSP70 刺激PFb表达IL-6蛋白和IL-6mRNA的水平在零到七十二小时内呈一定的时效关系。ELISA法检测示:从第12h起HSP70刺激PFb产生IL-6蛋白开始明显增多,是对照组的1.25倍,第四十八小时达到高峰(是对照组的2.58倍),第七十二小时有明显下降,但仍是对照组的1.98倍;半定量RT-PCR法检测示:从六小时起HSP70刺激PFb产生II,-6mRNA的量较对照组开始有明显差异,第6h. 12h.24h. 48h. 72h的IL-6mRNA的OD I}/ODm值分别是对照组的1.57倍、2.27倍、3.09倍、2.08倍、1.82倍。

  3,HSP70刺激PFb上调IL.-6蛋白和IL-6mRNA的效应在二十四小时内能被阻滞。ELISA法检测示:42.2319.41. 118.46122.67. 68.40114.43,HSP70十PDTC组、HSP70组和对照组表达特异性抑制剂PDTCIL,-6蛋白量分别为HSP70十PDTC组与对照组相比P<0.05;半定量RT-PCR法检测示:HSP70十PDTC组、HSP70组和对照组的。D }}/OD}},值分别为;0.14410.048.0.533t0.100.0.295t0.081,HSP70+PDTC组与对照组相比P<0.05。

  结论:HSP70能增强NF-KB介导的PFbIL-6蛋白合成和IL-6mRNA表达,提示HSP70可能是诱导PFb表达高水平IL-6的重要因素之一。此次实验,对于银屑病的研究与治疗具有重要意义,为银屑病治疗开辟了新的方向。

  参考资料:

  1,休克蛋白70对银屑病成纤维细胞表达IL-6的影响《西安交通大学医学院论文》2013年3月9日【引用日期2014-6-3】

【具体治疗方案可咨询潍坊东方银屑病研究院,谨遵医嘱,切勿自行用药。如果您无法确定自身病情,可关注我院微信wfyxb120,在线提供皮肤病照片,我们会为您识别并提供相关治疗建议。】

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